二戰期間，希特勒在世界各地召集考古學家尋找“失落的約柜”——圣經中引導希伯來人與上帝交流的圣物，希特勒欲借其來護佑納粹的戰爭為了使希特勒的計劃破滅，印第安納瓊斯博士（Harrison Ford飾）奔赴尼泊爾，一邊奮力挖掘蛛絲馬跡，一邊還要與無孔不入的納粹分子周旋。憑借著過人的智慧和異于常人的膽量及大無畏的勇氣，瓊斯終于在羅馬找到了指示約柜位置的太陽手杖，繼而發現了約柜。就在大功告成之際，納粹軍卻侵吞了勝利果實，還將瓊斯等人留在了蛇穴里！但是無往不勝的瓊斯總是有辦法死里逃生，并狠狠地還以顏色！